SP 세플라이프 ®FF 아가로스 크로마토그래피 수지
아가로스 크로마토그래피 수지
SP 세플리프 FF
SP 세플라이프 ® FF 아가로스 크로마토그래피 수지 제품 개요:
SP 세프라이프 ® FF 크로마토그래피 수지 새로운 고도로 가교된 아가로스 크로마토그래피 수지 Sunresin에서 독자적으로 개발한 것으로, 프로필렌에 결합된 술폰산 기반 프로필의 일종입니다. 아가로스겔 여과크로마토그래피수지 . 높은 유량, 낮은 역압, 높은 동적 로딩, 우수한 화학적 안정성 및 기계적 특성, 낮은 비특이적 흡착, 높은 회수율, 편리한 스케일업, 생산 시간 단축 및 생산성 향상을 갖춘 강력한 양이온 교환 크로마토그래피 수지입니다. 널리 사용됩니다. 단백질의 이온교환 분리 , 핵산 그리고 펩타이드 하류의 생물제약 및 생물공학 .
SP 세플라이프 ® FF 아가로스 크로마토그래피 수지 매개변수:
| 수지코드 | SP 세플라이프 ® FF |
| 모습 | 화이트 스피어 비즈 |
| 입자크기(粒录m) | 45파운드 165 |
| 행렬 | 세플라이프 6FF |
| 유량(cm/h) | |
| 압력(MPa) | 0.3 |
| 내열성 | 121인치, 물에 30분 담가두기 |
| pH 안정성 | 4~13(장기), 3~14(단기, CIP) |
| 애플리케이션 | 단백질, 핵산 및 펩타이드 하류
생물제약 및 생물공학 |
| 화학적 안정성 | 다음 액체에서 안정함: 모든 일반적인 수성 완충액;
1 mol/L 수산화나트륨; 8 mol/L 요소; 8 mol/L 구아니딘염산염; 70% 에탄올 |
| 흡착량(mg/ml) | >55mg/ml 리소자임/ml |
| 이온교환용량 | 0.18 锝�0.25mmol /ml |
| 작동 온도 | 4~40인치 |
| 테스트 조건:
크로마토그래피 컬럼 16mm * 300mm; 컬럼 베드 높이 15cm; 온도 25°;
이동상은 0.1 mol/L NaCl입니다. | |
SP 세플라이프 ® FF 아가로스 크로마토그래피 수지 테스트 지침:
1. 컬럼 패킹
포장은 표준 운영 절차에 따라 수행됩니다. 각 재료가 작동 온도에 있는지 확인해야 하며, 포장하기 전에 젤을 탈기해야 합니다.
2.평형
로딩 저울의 2~5 컬럼 볼륨으로 컬럼의 평형을 맞추고 유출물의 전도도와 pH가 로딩 버퍼의 전도도와 pH와 정확히 동일한지 확인합니다.
저울 용액은 NaOAC, PBS 등과 같은 저농도 완충 용액입니다. 일반적으로 사용되는 저울 용액은 0.1 mol/L 아세트산 완충액, pH 5.0입니다.
3. 샘플 로딩
(1) 검체는 천칭용액으로 조제하고 탁한 검체는 원심분리하여 여과하여 적재한다. 염농도가 너무 높은 검체는 처리하여 분주한다.
(2)일반적으로 목적물을 컬럼에 합치고, 불순물은 평형용액으로 씻어내고, 목적물을 씻어내기 위해 용출액을 선택합니다.
(3)매체가 샘플 성분을 흡착하는 정도는 샘플의 전하 특성, 이동상의 이온 강도 및 pH에 따라 달라집니다. 염 농도가 낮을수록 매질이 샘플 성분에 더 단단히 흡착됩니다. SP 크로마토그래피 매질을 사용할 때 권장 pH는 대상 제품의 등전점보다 1단위 높습니다.
4. 용출
용출은 염 농도를 증가시키거나 pH를 증가시켜 수행할 수 있으며, 일반적으로 염 농도를 증가시킵니다. 일반적으로 사용되는 용출액(용액 B)은 다음과 같습니다. 0.1 mol/L 아세트산 완충액 + 2 mol/L NaCl, pH 5.0.
5. 재생
일반적으로 완충액은 높은 염 농도(1~2mol/L NaCl 함유)로 세척하거나 pH를 10배 이상 낮춘 후, 결합된 단백질의 평형 용액으로 세척하여 균형을 맞춥니다.
재생 중에 비활성화된 단백질이나 지질이 씻겨 내려가지 않으면 CIP(제자리 세척)로 제거할 수 있습니다.
6.CIP
(1) 이온결합으로 결합된 단백질의 경우 2M NaCl의 컬럼베드용량의 0.5~1배로 제거가 가능하다.
(2) 침전된 단백질, 소수성 결합 단백질 또는 지질의 경우 먼저 0.1 M NaOH의 1 컬럼 베드 볼륨으로 세척한 다음 pH가 중성이 될 때까지 평형 완충 용액으로 세척할 수 있습니다.
(3) 강하게 소수성 결합된 단백질, 지질 등의 경우 70% 에탄올 또는 30% 이소프로판올의 베드 부피의 4~10배로 세척한다. 이때 유기용매의 농도는 점차 구배적으로 증가해야 하며 그렇지 않으면 거품이 발생하기 쉽다.
7. 보관
밀봉하여 4~30℃에서 보관(보존액은 20% 에탄올 + 0.2mol/L 아세트산나트륨)하고, 건조하고 통풍이 잘되는 깨끗한 장소에 보관하며, 동결시킬 수 없습니다.
사용된 컬럼은 4~8℃, 20% 에탄올 용액 + 0.2mol/L 아세트산나트륨에 보관합니다.
SP 세플라이프 ® FF 아가로스 크로마토그래피 수지 주의:
(1)컬럼 선정 : 이론적으로는 컬럼 길이가 충분하다면 이상적인 분리능을 얻을 수 있으나 컬럼 유량은 압력구배와 관련이 있으므로 컬럼 길이가 늘어나 유량이 느려지고 피크가 넓어지며 분리능이 감소한다. 컬럼 직경이 커져 액체 흐름의 불균일성이 커지고 분리능이 현저히 감소한다.
(2) 정제과정 중 용출 완충액의 pH 및 이온강도는 엄격히 조절되어야 하며, 시료를 채취한 후 컬럼크로마토그래피를 실시하고 SP 크로마토그래피 매질은 용출 완충액과 완전히 평형을 이루어야 한다.
(3)기둥 바닥은 평평해야 하며 홈이나 기포가 없어야 하며, 그렇지 않은 경우 다시 채워야 합니다.
(4) 용출과정에서는 유속을 엄격히 조절해야 하며 너무 빠르지 않도록 해야 한다.
(5)시료의 양은 적어야 하며 농도도 너무 높아서는 안 된다.
(6)적재 및 전체 용출 과정 동안 실린더 표면이 건조되는 것을 방지합니다.
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