CM 세플라이프 ®FF 아가로스 크로마토그래피 수지
아가로스 크로마토그래피 수지
CM 세플리프 FF
CM 세플라이프 ® FF 아가로스 크로마토그래피 수지 제품 개요:
CM 세플라이프 ® FF 크로마토그래피 매체는 Sunresin에서 독자적으로 개발한 새로운 유형의 고도로 가교된 아가로스 크로마토그래피 매체입니다. 아가로스 겔 여과 크로마토그래피 매체에 카르복시메틸기를 결합하여 형성된 약한 양이온입니다. 이온교환크로마토그래피매체 . 높은 유량, 낮은 역압, 높은 동적 하중, 우수한 화학적 안정성 및 기계적 특성, 낮은 비특이적 흡착, 높은 회수율, 확장이 용이하며 생산 시간을 단축하고 생산 효율을 개선할 수 있습니다. 널리 사용됩니다. 이온교환크로마토그래피 정제 하류 단백질의, 핵산 그리고 펩타이드 ~에 생물제약 및 생물공학 .
CM 세플라이프 ® FF 아가로스 크로마토그래피 수지 매개변수:
| 수지코드 | CM 세플라이프 ® FF |
| 모습 | 화이트 스피어 비즈 |
| 입자 크기( 脦录 중 ) | 45~165 |
| 행렬 | 세플라이프 6FF |
| 유량(cm/h) | |
| 압력(MPa) | 0.3 |
| 내열성 | 121 파운드, 물에 30분 담가두기 |
| pH 안정성 | 4~13(장기), 3~14(단기, CIP) |
| 애플리케이션 | 단백질, 핵산 및 펩타이드 하류
생물제약 및 생물공학 |
| 화학적 안정성 | 다음 액체에서 안정함: 모든 일반 수용액 완충액; 1 mol/L 수산화나트륨; 8 mol/L 요소; 8 mol/L 구아니딘 염산염;
70% 에탄올 |
| 흡착량(mg/ml) | 60mg/ml 리소자임/ml |
| 이온교환용량 | 0.09 锝�0.13mmol /ml |
| 작동 온도 | 4~40인치 |
| 테스트 조건:
크로마토그래피 컬럼 16mm * 300mm; 컬럼 베드 높이 15cm; 온도 25°;
이동상은 0.1 mol/L NaCl입니다. | |
CM 세플라이프 ® FF 아가로스 크로마토그래피 수지 테스트 지침:
1. 컬럼 패킹
표준 운영 절차에 따라 포장 작업을 합니다. 각 재료가 작동 온도에 있는지 확인해야 하며, 포장하기 전에 젤을 탈기해야 합니다.
2. 균형
로딩 밸런스 용액의 베드 볼륨의 2~5배로 컬럼을 평형화합니다. 유출액의 전도도와 pH가 로딩 버퍼의 전도도와 pH와 정확히 같은지 확인합니다. 밸런스 용액은 Tris, PBS 등과 같은 저농도 버퍼 용액입니다.
3. 로딩 중
(1) 검체는 평형용액으로 조제하며 탁도가 높은 검체는 원심분리 및 여과 후 적재한다. 염농도가 너무 높은 검체는 처리 후 조제한다.
(2) 일반적으로 목적산물을 컬럼에 결합시키고, 불순물은 평형화 용액으로 씻어낸 후, 용출액을 선택하여 목적산물을 세척한다.
(3)매체가 샘플 성분을 흡착하는 정도는 샘플의 전하 특성, 이동상의 이온 강도, pH 값에 따라 달라집니다. 염 농도가 작을수록 매질이 샘플 성분을 더 단단히 흡착합니다. CM 크로마토그래피 매질을 사용할 경우 권장 pH 값은 대상 제품의 등전점보다 1단위 더 큽니다.
4. 용출
소금 농도를 높이거나 용출의 pH 값을 높이는 방법으로, 일반적으로 소금 농도를 높이는 데 사용됩니다.
5. 재생
일반적으로 먼저 고염도 완충액(1~2mol/L NaCl 함유)으로 세척하거나 컬럼 용량의 10배 이상 pH를 낮춘 후, 단백질 결합 시 평형화 용액으로 평형에 도달할 때까지 세척합니다.
재생 중에 세척하여 제거할 수 없는 비활성화된 단백질이나 지질이 있는 경우 CIP로 제거할 수 있습니다.
6.제자리 청소
(1) 이온결합으로 결합된 단백질은 2M NaCl의 bed volume의 0.5~1배로 제거가 가능하다.
(2) 침전된 단백질, 소수성 결합 단백질 또는 지질의 경우 먼저 0.1M NaOH의 1M 침대 용량으로 세척한 후 pH가 중성이 될 때까지 평형 완충액으로 세척합니다.
(3) 소수성 결합이 강한 단백질과 지질의 경우 70% 에탄올 또는 30% 이소프로필 알코올의 베드 부피의 4~10배로 세척한다. 유기 용매의 농도는 점진적으로 구배 방식으로 증가해야 한다는 점에 유의해야 하며 그렇지 않으면 거품이 발생하기 쉽다.
7. 보관
밀봉하여 4~30℃(보존용액은 20% 에탄올 용액)에서 건조하고 통풍이 잘되고 깨끗한 곳에 보관하며, 동결할 수 없습니다. 사용된 컬럼은 4~8℃, 20% 에탄올 용액에 보관합니다.
8. 교통
운송 중에는 햇빛, 비, 강한 압력을 피하고, 독성 및 유해 물질을 운반하는 것은 엄격히 금지되어 있습니다.
CM 세플라이프 ® FF 아가로스 크로마토그래피 수지 주의 사항:
(1)컬럼 선정 : 이론적으로는 컬럼이 충분히 길면 이상적인 분해능을 얻을 수 있지만 컬럼 유량은 압력 구배와 관련이 있기 때문에 컬럼 길이를 늘리면 유량이 느려지고 피크가 넓어지며 분해능이 감소합니다. 컬럼 직경이 커져 액체 흐름의 불균일성이 커지고 분해능이 크게 감소합니다.
(2) 정제 과정 동안 용출 완충액의 pH 및 이온 강도는 엄격하게 제어되어야 합니다. 샘플과 CM 크로마토그래피 매체는 컬럼 크로마토그래피 전에 용출 완충액으로 완전히 평형화되어야 합니다. A
(3) 설치된 기둥 베드는 평평해야 하며 홈이나 기포가 없어야 합니다. 그렇지 않은 경우 다시 설치해야 합니다.
(4) 용출 중 유속은 엄격히 조절해야 하며 너무 빠르지 않아야 합니다.
(5)시료의 양은 적어야 하며 농도도 너무 높아서는 안 된다.
(6) 시료 첨가 및 전체 용출 과정 중 실린더가 건조되는 것을 방지합니다.
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