mRNA 정제 및 분리를 위한 새로운 Oligo dT 수지: 시딩된 자기 비드 및 분사된 스티렌/DVB 수지를 기반으로 한 신기술 탐색
새로운 SunResin Seplife ®Oligo dT 친화성 수지는 체외 전사(IVT) 제조 공정에서 mRNA의 정제 및 분리를 위해 설계되었습니다. SunResin의 20년 특수 수지 제조 경험을 바탕으로 Seed Swelling을 통해 입자 크기가 매우 균일한 50 마이크론 고분자 수지를 제조하는 독창적인 기술을 설계했습니다. 수지는 올리고 dT20으로 관능화된 가교된 폴리스티렌 디비닐벤젠 수지입니다. 수지는 효소 및 플라스미드 DNA와 같은 전사 반응 과정의 구성 요소로부터 mRNA를 효과적으로 포착합니다.
셉라이프
® Oligo dT는 mRNA 코로나19 백신, 종양학 백신, AIDS 백신, 희귀 질환 치료 및 예방과 같은 백신에 사용되는 다양한 mRNA 구조의 선택성, 용량 및 대규모 다운스트림 정제에 대한 증가하는 수요를 충족하도록 설계되었습니다. 기타 주요 질병. 이 수지는 간단한 염(0.5M NaCl) 및 수성 정제 단계를 사용하여 폴리아데닐화(polyA) 꼬리를 통해 mRNA를 선택적으로 포착할 수 있습니다.
Oligo dT의 주요 특징은 플라스미드 DNA 및 기타 IVT 구성 요소를 효과적으로 제거하기 위해 조 전사 혼합물에서 간편한 mRNA 정제를 결합하고, 다양한 종류의 컬럼에 쉽게 적용할 수 있으며 탁월한 확장성을 통해 작업 흐름을 단순화합니다. 물론, 효율적인 CIP를 위해 65°C까지의 온도와 알칼리에도 우수한 안정성을 나타내도록 설계되었습니다.
Sunresin이 개발한 고유한 수지 기술을 사용하면 50Kg의 수지 배치를 제조할 수 있으므로 변동성에 대한 위험이 줄어들고 GMP 조건과 엄격한 QC 제어를 사용하여 동급 최고의 제조 능력을 갖추게 됩니다.
수지 미세구의 표면은 비특이적 흡착을 줄이기 위해 독점 기술을 사용하여 더욱 친수성이 되도록 수정되었습니다. 이는 장쇄 스페이서 암으로 이루어진 리간드를 첨가하여 이루어지므로 입체 장애가 감소하고 물질 전달 속도가 증가하며 높은 동적 결합이 보장됩니다. 그런 다음 비드의 표면을 폴리(dT)로 기능화하여 mRNA 폴리A 꼬리와 염기쌍을 통해 mRNA를 포획할 수 있습니다.
이 포스터에서는 표준 mRNA 정제 조건에서 포획 및 방출을 사용하는 Oligo dT를 사용하여 1200nt mRNA를 정제하는 응용 프로그램을 소개합니다. 또한, 수지에 코팅을 수행하면 플라스미드 DNA 및 기타 전사 혼합 성분이 감소됩니다.
또한, R&D 개발 단계에서 정제와 분리가 용이하도록 올리고 dT로 기능화한 새로 개발된 자성 수지도 소개합니다. 이 자기 비드는 1~3 마이크론의 단일 크기 비드를 만들 수 있는 독특한 시딩 기술로 만들어진 폴리스티렌 디비닐벤젠의 핵심 수지에서 시작됩니다. 그런 다음 이러한 비드는 Fe3O4로 코팅된 다음 상자성 물질이 방출되지 않도록 비드를 완전히 보호하는 폴리우레탄 쉘로 완전히 코팅됩니다.
이러한 자성 입자를 사용하면 mRNA를 쉽고 빠르게 분리할 수 있으므로 새로운 유전자 치료법의 개발 및 스크리닝 과정이 향상됩니다.
