New Oligo dT resins for mRNA purification and isolation: exploring new technology based on seeded magnetic beads and jetted styrene/DVB resins

The new Sunresin Seplife ®Oligo dT affinity resin is designed for the purification and isolation of mRNA from in vitro transcription (IVT) manufacturing processes. Using the 20 years experience of Sunresin in manufacturing specialty resins, we have designed a unique technology that manufactures a 50 micron polymeric resin with very uniform particle sizes by seed swelling. The resin is a crosslinked polystyrene divinylbenzene resin functionalized with oligo dT20. The resin effectively captures mRNA from components of the transcription reaction process, such as enzymes and plasmid DNA.

Seplife ® Oligo dT has been designed to fulfill the increasing demand in selectivity, capacity and large scale downstream purification of a range of mRNA constructs used in vaccine, such as mRNA COVID-19 vaccine , oncology vaccines, AIDS vaccines, treatment and prevention of  rare diseases and other major diseases. This resin allows to selectively captures the mRNA via the polyadenylated (polyA) tail using simple salt (0.5M NaCl) and water-based purification steps.

Oligo dT의 주요 특징은 조악한 전사 혼합물에서 mRNA를 쉽게 정제하여 플라스미드 DNA 및 기타 IVT 구성 요소를 효과적으로 제거할 수 있다는 점, 다양한 종류의 컬럼에 쉽게 적용할 수 있어 워크플로우가 간소화된다는 점, 그리고 뛰어난 확장성을 제공한다는 점입니다. 또한, 이 수지는 최대 65℃의 온도와 알칼리 환경에서도 우수한 안정성을 보여 효율적인 CIP(시뮬레이션 세척)에 적합합니다.

선레진이 개발한 독자적인 수지 기술은 50kg 단위의 수지 배치 생산을 가능하게 하여 변동성 위험을 줄이고 GMP 조건 및 엄격한 품질 관리 하에 최고 수준의 제조 역량을 제공합니다.

수지 미세구체의 표면은 비특이적 흡착을 줄이기 위해 자체 개발한 기술을 이용하여 친수성을 높이도록 개질되었습니다. 이는 긴 사슬 스페이서 암으로 구성된 리간드를 첨가함으로써 이루어지며, 이를 통해 입체적 장애가 감소하고 물질 전달 속도가 증가하며 높은 동적 결합력이 확보됩니다. 또한, 비드 표면은 mRNA의 폴리A 꼬리와 염기쌍을 형성하여 mRNA를 포획할 수 있도록 폴리(dT)로 기능화되었습니다.

본 포스터에서는 표준 mRNA 정제 조건에서 포획 및 방출 방식을 이용하여 Oligo dT로 1200nt mRNA를 정제하는 응용 사례를 제시합니다. 또한, 수지에 코팅을 적용함으로써 플라스미드 DNA 및 기타 전사 혼합물 성분의 함량을 줄일 수 있습니다.

또한, 연구 개발 단계에서 손쉬운 정제 및 분리를 위해 올리고 dT로 기능화된 새로운 자성 수지를 소개합니다. 이 자성 비드는 독자적인 시딩 기술로 제조된 폴리스티렌 디비닐벤젠 코어 수지를 기반으로 하며, 1~3 마이크론의 단일 크기 비드를 만들 수 있습니다. 이 비드는 Fe3O4로 코팅된 후, 상자성 물질의 방출을 완벽하게 차단하는 폴리우레탄 쉘로 완전히 코팅됩니다.

이러한 자성 입자는 mRNA를 쉽고 빠르게 분리할 수 있게 해주므로 새로운 유전자 치료법의 개발 및 선별 과정을 향상시킵니다.