CM 세라이프 ®FF 아가로스 크로마토그래피 수지
아가로스 크로마토그래피 수지
CM 세라이프 FF
CM 세라이프 ® FF 아가로스 크로마토그래피 수지 제품 프로필:
CM 세라이프 ® FF 크로마토그래피 매체는 Sunresin이 독자적으로 개발한 고도로 가교된 아가로스 크로마토그래피 매체의 새로운 유형입니다. 이는 아가로스 겔 여과 크로마토그래피 매질에 카르복시메틸 그룹이 결합하여 형성된 약한 양이온입니다. 이온 교환 크로마토그래피 매질 . 높은 유속, 낮은 배압, 높은 동적 부하, 우수한 화학적 안정성 및 기계적 특성, 낮은 비특이적 흡착, 높은 회수율, 규모 확장이 용이하고 생산 시간을 단축하고 생산 효율성을 향상시킬 수 있습니다. 널리 사용되는 이온 교환 크로마토그래피 정제 하류 단백질의, 핵산 그리고 펩타이드 ~에 바이오의약품 및 생명공학 .
CM 세라이프 ® FF 아가로스 크로마토그래피 수지 매개변수:
수지 코드 | CM 세라이프 ® FF |
모습 | 백색 구체 구슬 |
입자 크기( 脦录 중 ) | 45~165 |
행렬 | 셉라이프 6FF |
유량(cm/h) | |
압력(MPa) | 0.3 |
내열성 | 121 , 물에 30분 동안 담가두기 |
pH 안정성 | 4~13(장기), 3~14(단기, CIP) |
애플리케이션 | 단백질, 핵산 및 펩타이드 다운스트림
바이오의약품과 생명공학의 |
화학적 안정성 | 다음 액체에서 안정함: 모든 일반 수성 완충액; 1mol/L 수산화나트륨; 8mol/L 요소; 8 mol/L 구아니딘 염산염;
70% 에탄올 |
흡착(mg/ml) | 60mg/ml 리소자임/ml |
이온 교환 용량 | 0.09锝≦0.13mmol /ml |
근무온도 | 4~40' |
시험 조건:
크로마토그래피 컬럼 16mm * 300mm; 기둥 침대 높이 15cm; 온도 25°C;
이동상은 0.1 mol/L NaCl이었습니다. |
CM 세라이프 ® FF 아가로스 크로마토그래피 수지 테스트 지침:
1. 컬럼 포장
표준 운영 절차에 따라 포장 작업을 수행합니다. 각 재료가 작동 온도에 있는지 확인해야 하며 포장하기 전에 젤의 가스를 제거해야 합니다.
2.밸런스
로딩 밸런스 용액 층 부피의 2~5배로 컬럼을 평형화합니다. 유출물의 전도도 및 pH가 로딩 버퍼의 전도도 및 pH와 정확히 동일한지 확인하십시오. Balance 용액은 Tris, PBS 등 저농도 완충용액입니다.
3. 로딩
(1) 시료는 균형 용액으로 준비되며 혼탁한 시료는 로딩하기 전에 원심분리하고 여과해야 합니다. 처리 후 염 농도가 너무 높은 샘플이 준비됩니다.
(2) 일반적으로 목적 생성물을 컬럼에 결합시키고, 평형 용액으로 불순물을 씻어낸 후, 용리액을 선택하여 목적 생성물을 세척합니다.
(3) 매질이 시료 성분을 흡착하는 정도는 시료의 전하 특성, 이동상의 이온 강도 및 pH 값에 따라 달라집니다. 염분 농도가 낮고 배지가 시료 성분을 더 단단하게 흡착합니다. CM 크로마토그래피 매체를 사용할 때 권장되는 pH 값은 대상 제품의 등전점보다 1단위 더 높습니다.
4.용출
염분 농도를 높이거나 용출을 위한 pH 값을 높이십시오. 일반적으로 염분 농도를 높이는 데 사용됩니다.
5.재생
일반적으로 먼저 고염도 완충액(1~2mol/L NaCl 함유)으로 세척하거나 pH를 컬럼 부피의 10배 이상 감소시킨 후 단백질 결합 시 평형 용액으로 평형이 될 때까지 세척합니다.
재생 중에 씻어낼 수 없는 비활성화된 단백질이나 지질이 있는 경우 CIP로 제거할 수 있습니다.
6. 제자리 청소
(1)이온결합으로 결합된 단백질은 2M NaCl의 베드부피의 0.5~1배 정도 제거가 가능하다.
(2)침전된 단백질, 소수성 결합 단백질 또는 지질의 경우 먼저 1M 베드 부피의 0.1M NaOH로 헹구고 pH가 중성이 될 때까지 평형 완충액으로 세척할 수 있습니다.
(3)소수성 결합이 강한 단백질 및 지질의 경우 베드 부피의 4~10배인 70% 에탄올 또는 30% 이소프로필 알코올로 세척합니다. 유기용매의 농도는 점진적으로 경사지게 증가하며, 그렇지 않으면 기포가 발생하기 쉽다는 점에 유의해야 합니다.
7. 보관
밀봉하여 4~30°C(보존액은 에탄올 20%)에서 건조하고 통풍이 잘 되며 깨끗한 곳에 보관하며 냉동할 수 없습니다. 사용한 컬럼은 4~8°, 20% 에탄올 용액에 보관합니다.
8.교통
운송 중 햇빛, 비, 심한 압력을 피하고 독성 및 유해 물질을 가지고 운송하는 것을 엄격히 금지합니다.
CM 세라이프 ® FF 아가로즈 크로마토그래피 수지 주의가 필요한 사항:
(1) 컬럼 선택: 이론적으로 컬럼이 충분히 길면 이상적인 분해능을 얻을 수 있지만 컬럼 유속은 압력 구배와 관련되어 있으므로 컬럼 길이를 늘리면 유속이 느려지고 피크가 발생합니다. 확대되고 해상도가 감소합니다. 컬럼의 직경이 증가하면 액체 흐름의 불균일성이 증가하고 분해능이 크게 감소합니다. ㅏ
(2) 정제 과정에서 용출 완충액의 pH와 이온 강도를 엄격하게 관리해야 합니다. 시료와 CM 크로마토그래피 매질은 컬럼 크로마토그래피 전에 용출 완충액으로 완전히 평형을 이루어야 합니다. ㅏ
(3) 설치된 컬럼 베드는 평평하고 채널이나 기포가 없어야 하며 그렇지 않은 경우 다시 설치해야 합니다.
(4) 용출 시 유속은 엄격하게 조절되어야 하며 너무 빠르지 않아야 합니다.
(5) 시료의 양은 작아야 하며 농도가 너무 높지 않아야 합니다.
(6) 샘플 추가 및 전체 용출 과정에서 실린더가 건조되는 것을 방지하십시오.