SP 세프라이프 ®FF 아가로스 크로마토그래피 수지
아가로스 크로마토그래피 수지
SP 세라이프 FF
SP 세프라이프 ® FF 아가로스 크로마토그래피 수지 제품 프로필:
SP 세포생활 ® FF 크로마토그래피 수지 고도로 교차된 새로운 아가로스 크로마토그래피 수지 Sunresin이 독자적으로 개발한 제품입니다. 이것은 일종의 술폰산 기반 프로필이 결합된 것입니다. 아가로스 겔 여과 크로마토그래피 수지 . 높은 유속, 낮은 배압, 높은 동적 로딩, 우수한 화학적 안정성 및 기계적 특성, 낮은 비특이적 흡착, 높은 회수율, 편리한 확장, 생산 시간 단축 및 생산성 향상을 갖춘 강력한 양이온 교환 크로마토그래피 수지입니다. 그것은 널리 사용됩니다 단백질의 이온 교환 분리 , 핵산 그리고 펩타이드 하류 바이오의약품 및 생명공학 .
SP 세프라이프 ® FF 아가로스 크로마토그래피 수지 매개변수:
| 수지 코드 | SP 세프라이프 ® FF |
| 모습 | 백색 구체 구슬 |
| 입자크기(脦录m) | 45锝≦165 |
| 행렬 | 셉라이프 6FF |
| 유량(cm/h) | |
| 압력(MPa) | 0.3 |
| 내열성 | 121, 물에 30분 동안 담가두기 |
| pH 안정성 | 4~13(장기), 3~14(단기, CIP) |
| 애플리케이션 | 단백질, 핵산 및 펩타이드 다운스트림
바이오의약품과 생명공학의 |
| 화학적 안정성 | 다음 액체에서 안정함: 모든 일반 수성 완충액;
1mol/L 수산화나트륨; 8mol/L 요소; 8 mol/L 구아니딘 염산염; 70% 에탄올 |
| 흡착(mg/ml) | >55mg/ml 라이소자임/ml |
| 이온 교환 용량 | 0.18±0.25mmol/ml |
| 근무온도 | 4~40' |
| 시험 조건:
크로마토그래피 컬럼 16mm * 300mm; 기둥 침대 높이 15cm; 온도 25°C;
이동상은 0.1 mol/L NaCl이었습니다. | |
SP 세프라이프 ® FF 아가로스 크로마토그래피 수지 테스트 지침:
1. 컬럼 포장
포장은 표준 운영 절차에 따라 수행됩니다. 각 재료가 작동 온도에 있고 젤을 포장하기 전에 가스를 제거해야 하는지 확인해야 합니다.
2.평형
로딩 밸런스의 2~5 컬럼 볼륨으로 컬럼을 평형화하여 유출물의 전도도 및 pH가 로딩 버퍼의 전도도 및 pH와 정확히 동일한지 확인합니다.
밸런스액은 NaOAC, PBS 등의 저농도 완충용액이다. 일반적으로 사용되는 균형 용액은 0.1 mol/L 아세테이트 완충액, pH 5.0입니다.
3.샘플 로딩
(1) 시료는 균형용액으로 준비하고 혼탁한 시료는 원심분리 및 여과하여 로딩한다. 염분 농도가 너무 높은 샘플을 처리한 후 분주합니다.
(2) 일반적으로 목적산물을 컬럼에 합치고 평형용액으로 불순물을 씻어낸 후 용리액을 선택하여 목적산물을 세척한다.
(3) 매질이 시료 성분을 흡착하는 정도는 시료의 전하 특성, 이동상의 이온 강도 및 pH에 따라 달라집니다. 염분 농도가 낮고 배지가 시료 성분에 더 단단하게 흡착됩니다. SP 크로마토그래피 매체를 사용할 때 권장되는 pH는 대상 제품의 등전점보다 1단위 높습니다.
4.용출
용출은 염 농도를 높이거나 pH를 높이는 방법으로 수행할 수 있으며, 일반적으로 염 농도를 높이면 됩니다. 일반적으로 사용되는 용리액(용액 B): 0.1 mol/L 아세테이트 완충액 + 2 mol/L NaCl, pH 5.0.
5.재생
일반적으로 완충액은 고농도의 염분(1~2mol/L NaCl 함유)으로 세척하거나 pH를 10배 이상 감소시킨 후 결합된 단백질의 평형용액으로 세척하여 균형을 맞추게 됩니다.
재생 중에 비활성화된 단백질이나 지질이 씻겨나가지 않으면 CIP(In-Place Cleaning)를 통해 제거할 수 있습니다.
6.CIP
(1) 이온 결합으로 결합된 단백질의 경우 2M NaCl의 0.5~1 컬럼 베드 부피로 제거할 수 있습니다.
(2) 침전된 단백질, 소수성 결합 단백질 또는 지질의 경우 먼저 1 컬럼 베드 부피의 0.1M NaOH로 세척한 다음 pH가 중성이 될 때까지 평형 완충 용액으로 세척할 수 있습니다.
(3) 소수성이 강한 단백질, 지질 등의 경우에는 베드 부피의 4~10배인 70% 에탄올 또는 30% 이소프로판올로 세척합니다. 유기용매의 농도는 기울기 방식으로 점차 증가합니다. 그렇지 않으면 거품이 쉽게 생성됩니다.
7. 보관
밀봉하여 4~30°C(보존액은 20% 에탄올 + 0.2mol/L 아세트산나트륨)에서 건조하고 통풍이 잘 되며 깨끗한 곳에 보관하며 냉동할 수 없습니다.
사용한 컬럼은 4~8°, 20% 에탄올 용액 +0.2mol/L 아세트산나트륨에 보관됩니다.
SP 세프라이프 ® FF 아가로스 크로마토그래피 수지 주의:
(1) 컬럼 선택: 이론적으로 컬럼이 충분히 길면 이상적인 분리능을 얻을 수 있지만 컬럼 유속은 압력 구배와 관련되어 있으므로 컬럼 길이가 길어져 유속이 느려지므로 피크가 더 넓고 해상도가 감소합니다. 컬럼의 직경이 증가하면 액체 흐름의 불균일성이 증가하고 분리능이 크게 감소합니다.
(2) 정제 과정에서 용출 완충액의 pH와 이온 강도를 엄격하게 관리해야 합니다. 컬럼 크로마토그래피는 시료를 채취한 후 수행해야 하며 SP 크로마토그래피 매질은 용출 완충액과 완전히 평형을 이루어야 합니다.
(3) 컬럼 베드는 홈이나 기포가 없이 평평해야 합니다. 그렇지 않으면 다시 포장해야 합니다.
(4) 용출 과정에서 유속은 엄격하게 제어되어야 하며 너무 빠르지 않아야 합니다.
(5) 시료의 양은 작아야 하며 농도가 너무 높지 않아야 합니다.
(6) 로딩 및 용출 전 과정에서 실린더 표면이 건조되는 것을 방지합니다.
