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완충 용액
완충 용액을 선택할 때 pH와 이온 강도는 목표 생성물과 불순물의 분리뿐만 아니라 생성물 수율에도 영향을 미치는 두 가지 핵심 요소입니다. 선택하는 pH는 목표 생성물의 등전점, 안정성 및 용해도에 따라 달라지는데, 이는 분리된 물질이 이온 교환이 가능한 상태가 되도록 할 뿐만 아니라 높은 활성을 유지하기 위해서도 중요합니다. 이온 교환체의 pK 값 또한 고려해야 합니다.
용출 및 재생
크로마토그래피 매질이 소진되면 용출해야 합니다. 기본 원리는 활성이 더 높은 이온이나 작용기를 이용하여 목표 물질을 탈착시키는 것입니다. 흡착제마다 활성이 다르므로, 크로마토그래피 매질에서 단백질을 용출시키기 위해서는 적절한 용출액을 선택해야 합니다.
이온 교환 컬럼은 어떻게 작동하나요?
일정 시간 동안 작동을 진행하면 수지층은 포화 수지 영역, 물질 전달 영역 및 신규 수지 영역으로 나뉘게 됩니다. 작동 시간이 증가함에 따라 물질 전달 영역은 점차 감소하여 결국 수지층 바닥까지 물질 전달 영역이 관통하고 전체 수지층이 파괴됩니다.
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